如何将讲实验室离心机训练成帮手

发布时间：2021/2/4 15:15:30      浏览:

　　实验室离心机用对了是“帮手”，用错了就是“杀手”！

　　就拿植物dna提取来说，原理就是去掉植物细胞壁，细胞膜，质体，线粒体，叶绿体然后剩下细胞核了，这就是我们需要的DNA。

　　通常采用机研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。

　　十二烷基肌酸钠、十六烷基三甲基溴化铵简称为CTAB、十二烷基硫酸钠简称SDS，等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来。再加入苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心机离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物总DNA溶液。

　　虽然提取植物叶片的DNA比较简单，用下离心机再根据植物,找段基因的序列设计引物，再顺势PCR一下了,看看个能把这段基因扩出来，整个过程其实需要用的到的设备并不多，重要的就离心机跟PCR仪器。

　　但是这里面需要注意的细节有很多，比如：

　　使用实验室离心机的注意事项：

　　1. 离心机在预冷状态时，离心机盖必须关闭，离心结束后取出转头要倒置于实验台上，擦干腔内余水，离心机盖处于打开状态。

　　2. 转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上，或摆放在实验台上，千万不可不拧紧浮放在转头上，因为一旦误启动，转头盖就会飞出，造成事故！

　　3. 转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙，如有缝隙要拧开重新拧紧，直至确认无缝隙方可启动离心机。

　　4. 在离心过程中，操作人员不得离开离心机室，一旦发生异常情况操作人员不能关电源(POWER），要按STOP 。在预冷前要填写好离心机使用记录。

　　5. 不得使用伪劣的离心使管，不得用老化、变形、有裂纹的离心管。

　　6. 离心机套管底部要垫棉花或试管垫。

　　7. 电动离心机如有噪音或机身振动时，应立即切断电源，即时排除故障。

　　8. 离心管必须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管另外一支要用等质量的水代替。

　　9. 启动离心机时，应盖上离心机顶盖后，方可慢慢启动。

　　10. 分离结束后，先关闭离心机，在离心机停止转动后，方可打开离心机盖，取出样品，不可用外力强制其停止运动。

　　使用PCR仪器的注意事项：

　　(1)PCR仪使用的环境要恒定，工作环境的温度不能过高或过低，最好在用空调的房间使用，有些PcR仪有温度保护程序，在过低的温度下机器不能启动。

　　(2)电源要稳定，工作的电压不能波动过大，波动过大会造成电子器件损坏，一般建议将PcR仪电源接于稳压电源上。

　　但是要注意的是，不论是离心机还是PCR仪器，使用前都要详细阅读使用说明书，遇到不能解决的问题不要随意拆卸机器，应该让生产厂商负责售后服务的专业工程师进行处理。