安全是实验前提 规范操作是实验基础

发布时间：2021/3/12 18:55:51      浏览:

　　离心机在植物组织蛋白质提取中的应用讲解.

　　本文讲解的提取方法是采用三氯醋酸—丙酮沉淀法，详细步骤如下：

　　1、在液氮中研磨叶片

　　2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心机离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。

　　3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心机离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。

　　4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心机离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。

　　5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。

　　药品：

　　提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮

　　裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的去离子水中（终体积为5ml），使用前再加入1M的DTT65ul/ml。

　　这种方法针对双向电泳，杂质少，离子浓度小的特点！当然单向电泳也同样适用，只是电泳的条带会减少！

　　注意在离心机的使用过程中，都必须遵循一些安全要求：

　　转鼓的强度计算应符合JB／T 8105使用范围所界定的规定，其结构及各零、部件，必须有足够的强度、刚度和稳定性。

　　应保证在规定的工作条件下，运行安全可靠，并且操作维护方便，在操作人员遵守操作规程的条件下，安全防护装置应确保人身的安全。

　　在按规定条件制造、安装、贮运和使用时，不得对人身安全构成威胁和造成伤害。

　　离心机密闭防爆要求

　　1）处于密闭、易燃、易爆环境或潮湿环境下工作的离心机，应符合密闭、防燃、防爆、防湿等有关标准或法规的要求。

　　2）处于密闭、易燃、易爆环境或潮湿环境下工作的离心机，应有可靠的安全防护措施。

　　上海卢湘仪离心机仪器有限公司作为经验丰富的离心机厂家，在设计制造离心机以及培训使用离心机的时候，严格按照以上要求执行！